O René Belloq (Paul Freeman) é o principal antagonista do filme. Ele é um arqueólogo francês que toma crédito por descobertas do Indiana Jones. Na abertura do filme, Belloq e a tribo dos Hovitos, forçam Indiana a entregar a “Fertility Idol”, que teve que enfrentar inúmeras armadilhas para conseguir.

Belloq ajuda os nazistas a encontrar a Arca da Aliança. Ele pretende usar a relíquia para falar com Deus. Os espíritos dentro da Arca matam os nazistas e fazem a cabeça de Belloq explodir, permitindo que Indiana leve a Arca de volta ao governo dos Estados Unidos. Em um ponto do filme, Belloq diz a Indiana que eles são muito parecidos, e que ele é o seu “reflexo sombrio”.

A novela revela que Belloq se torna inimigo de Indiana no curso de doutorado, quando ele plagia seu artigo de estratigrafia, ganhando assim um prêmio que pertencia ao Indiana.

Outro encontro em 1934 é detalhado, quando Indiana passa meses preparando uma escavação no Rub´al Khali, para chegar e descobrir que Belloq já havia cavado na região. Indiana também encontra Belloq em outros dois “romances" de Max McCoy, estabelecido antes do filme, onde ele lhe dá a informação de onde está localizada a caveira de cristal.

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